本篇文章给大家谈谈液相色谱仪活化,以及液相色谱仪的工作流程对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。
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十问十答|关于液相色谱柱使用中的常见问题解答
反相色谱柱初次使用时,采用纯有机试剂如甲醇、乙腈,从低流速开始,逐步提升至常规使用流速,冲洗总体积建议为柱体积的20倍。此步骤有助于固定相充分湿润,碳链舒展开,使色谱柱性能达到最佳状态,并检查压力和基线。
液相色谱柱的保养方法?
先以0.1~-0.2ml/min的流速冲洗,等看到有液体从柱子中流出后,持续10mins之后再接上检测器,以循序渐进方式将流速调至0ml/min(LC/MS柱子应以0.2ml/min的流速进行),继续活化2小时。
对于液相色谱柱的保养,首先要注意的是储存条件。未使用时,应将液相色谱柱储存在干燥、阴凉、避光和无尘的环境中,以防止柱内填料受潮或受污染。长期不使用的柱子,应使用适当的保护剂或溶剂保存,如纯甲醇或乙腈,以保持柱子的稳定性和分离效果。其次,定期清洗是液相色谱柱保养的重要环节。
反相柱的维护可以通过特定的冲洗步骤来延长其使用寿命。首先,用10%甲醇以0流速冲洗一个小时,接着用纯甲醇继续清洗45-60分钟。如果效果不佳,可以尝试用甲醇与水按照5:95的比例进行冲洗,之后再用甲醇冲洗。异丙醇也是一种有效选择,其效果比甲醇更好。通过适当的冲洗操作,可以保持柱子的良好柱效。
反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含缓冲盐的流动相,实验完成后应用20-30柱体积的甲醇或乙腈和水的50:50混合物进行冲洗。如需过夜保存,可将流速保持在 0.1 到 0.2 mL/min。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
氰基液相色谱柱在使用前怎么进行活化处理
原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成,造成的结果就是色谱柱的柱效远远高于原始的经典液相色谐,它柱子使用后还能具有高度灵敏度检测器。能够对流出来的分析物进行连续检测。
高效液相色谱柱的填充剂选择直接关系到分析结果的准确性和稳定性。常见的填充剂包括化学键合硅胶,如十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶、氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
液相色谱柱应该如何活化?
1、清洗氨基柱的方法取决于其使用条件。若在正相条件下使用,首先使用50倍柱体积的异丙醇清洗,需适当降低流速;然后用50倍的甲醇清洗;接着用异丙醇过渡回正相流动相。
2、因此,在首次使用时,没有必要用水进行冲洗,只要用流动相彻底地平衡色谱柱即可。如果使用流动相添加剂(如缓冲液或离子对试剂),建议使用含原有比例但不含这些添加剂的流动相进行中间过渡。使用10至20个色谱柱体积进行冲洗将有助于过渡到流动相。
3、首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大需适当放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之 后,用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相,即可。(2)平时在反相条件下使用:缓冲盐应及时冲洗,不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等,属常识就不作特别交待。
4、酸性活化:将柱子用酸性溶液进行洗涤,如使用 0.1 M 的盐酸、甲酸或乙酸等溶液。这可以去除柱子上的碱性杂质,并帮助恢复其亲水性。碱性活化:将柱子用碱性溶液进行洗涤,如使用 0.1 M 的氢氧化钠或氢氧化钾等溶液。这可以去除柱子上的酸性杂质,并帮助恢复其疏水性。
5、液相色谱柱的活化、维护与注意事项液相色谱柱根据极性差异分为正相柱(如硅胶表面键合CN或NH3柱)和反相柱(如C18柱),以及离子交换柱、GPC柱等。使用前,需进行性能测试并记录,确保柱子在最佳条件下。
液相色谱仪活化的介绍就聊到这里吧,感谢你花时间阅读本站内容,更多关于液相色谱仪的工作流程、液相色谱仪活化的信息别忘了在本站进行查找喔。